科研elisa試劑盒總是需要時刻保溫,主要因為ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結合只在固相表面上發作。以抗體包被的夾心法為例,參加板孔中的標本,其間的抗原并不是都有平等的和固相抗結合的時機,只需靠近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體觸摸。這是一個逐步平衡的進程,因而需經分散才干到達反響的終點。
科研elisa試劑盒對于樣本的處理及要求:
1、血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過一夜,然后1000×g離心20分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2、血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3、組織勻漿:用預冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。然后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4、細胞培養物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
希望上述內容能夠幫助大家更好的了解本試劑盒。